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显微镜的相片是利用入射电子束与它作用后的透射电子作为信号,依靠数码显微镜将其聚焦成像,并经多级放大,后在荧光显微镜或照相底片上给出所要的图象。
在使用奥林巴斯显微镜拍照时,首先要根据使用者要求,调整适当的放大倍数。在物镜的辨别中,以往只根据物镜上所标的数字去辨认。作者总结出更简单的辨认方法:一是从物镜的长短辨别,长者为高倍,短者为低倍。二是根据颜色标记上辨认,带有黄周的为低倍10x,带有绿周的为低倍20 x,带有蓝圈的为高倍40,带有白圈的为更高倍100x。按照这两种方法去辨认物镜的放大倍数,简便易行,明显地缩短了选用所需物镜的时间。
奥林巴斯显微镜摄影拍照有以下五个程序,请广大用户需要注意:
1、光源接通,显微镜开关只“开”状态,电压调节在3~5伏;
2、相差显微镜与环状光阑相匹配(即10倍相差物镜与10倍环状光阑配用);
3、标本置载物台上,用10倍目镜调焦后,将摄影标记部位移入取景框中心位置;
4、轻轻旋转观察器刻度端的视度补偿环,取景框内双十字线清晰,调焦使标本清晰,再次用眼环视一下双十字线与图像,两者同时清晰时即可曝光;
5、实验完毕,电压下降至零位,关闭电源。
需要特别注意:
1、高数值孔径的物镜和低数值照相目镜组合可以提高物像反差;
2、相差显微镜可以用于活体材料和固定材料的研究。标本材料厚度应小于20微米,载玻片厚度在1毫米左右,若玻片过厚,亮环与相板的圆环不能合轴。
3、聚焦问题
转动粗调手轮,使载物台降至低位置,将标本放在载物台上,用标本片夹固定。把10x物镜切入光路对样品聚焦,将聚光镜升至高位置。缩小视场光阑,在视场中可见边缘模糊的视场光阑图像,微降聚光镜,至视场光阑的图像清晰聚焦为止。用聚光镜两个调中的螺杆把缩小的视场光阑图像调至视场中心,开放视场光阑直到光阑图像周边与视场边缘相接。
4、物镜与玻片距离
掌握好不同放大倍数的物镜与玻片的大致距离很重要。在使用10x物镜时,物距在1cm 左右。在使用高倍物镜时,其物距的临界值在1mm左右,在临界值附近密切注视显微镜内视野变化,从而提高找到清晰物像的速度。
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